（必備）天然藥物實驗報告

　　在經(jīng)濟飛速發(fā)展的今天，報告的適用范圍越來越廣泛，報告具有雙向溝通性的特點。一起來參考報告是怎么寫的吧，以下是小編為大家收集的天然藥物實驗報告，歡迎閱讀與收藏。

　　實驗一、槐米中蘆丁的提取、精制和鑒定

　　（一）實驗目的要求

　　制備蘆丁，供藥用。

　　通過蘆丁的制備，掌握黃酮類化合物的提取分離的原理和操作。

　　熟悉重結晶技巧。

　　了解和掌握黃酮類化合物的一些主要性質和鑒定方法。

　�。ǘ�）實驗的基本原理

　　1、蘆丁的提取原理

　　利用蘆丁結構中含有多個酚羥基，呈酚酸性，能在堿水中溶解的性質，可用堿性溶劑進行提取，提取液加酸后可沉淀析出（堿溶酸沉法）。也可利用蘆丁在冷水中溶解度小，在熱水中溶解度大的性質進行提取。

　　2、蘆丁的分離原理

　　利用蘆丁結構在冷乙醇中溶解度小，在熱乙醇中溶解度大，以及在熱水中溶解度大，在冷水中溶解度小的性質分離。蘆丁用溶劑加熱溶解后，趁熱抽濾，濾液放冷后能析出而達到分離的目的（如不純可再重復操作進行分離）。也可采用醇溶水沉法進行精制。

　　3、蘆丁的鑒定原理

　�。�1）利用吸附薄層色譜的分離原理，蘆丁與蘆丁對照品在同一條件下進行展開，顯色，以達到鑒定蘆丁的目的。

　　（2）通過專屬的化學顯色反應（如三氯化鋁顯色反應），確定蘆丁的成分類型（黃酮類）。

　　（三）實驗內容

　　1、用堿提法、水提法、醇提法提取槐米中蘆丁。

　　2、用酸沉法和冷卻過飽和法分離蘆丁。

　　3、溶劑重結晶精制蘆丁。

　　4、薄層色譜法和顯色反應鑒定蘆丁

　�。ㄋ模�實驗藥材儀器與試劑

　　1、實驗藥材：槐米20g。

　　2、儀器：磁力加熱攪拌器、旋轉蒸發(fā)儀、粉碎機、500ml燒杯，1000ml燒杯，50ml燒杯，250ml園底燒瓶、500ml園底燒瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml錐形瓶、50ml錐形瓶、研缽、移液管、減壓過濾裝置，布氏漏斗，抽濾瓶、層析缸等。

　　3、試劑：硼砂、氧化鈣、 HCI、三氯化鋁、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、濾紙、PH試紙等。

　　（五）實驗方法與注意事項

　　1、蘆丁的提取

　�。�2）方法二（水提取法）稱取槐米粗粉20g，在研缽中研碎后放入500ml燒瓶中，（注意小心沿側邊放入磁子），加水200ml，用磁力加熱攪拌器加熱煮沸30min，（設定溫度為105°C，當加熱到103°時，觀察到：液體開始沸騰，有氣味，有泡沫產(chǎn)生。藥材翻滾，圓底燒瓶壁有水滴。且隨著時間的增多，泡沫越來越多，加熱20min左右后，泡沫豐富。稍調低轉速。），趁熱過濾。殘渣同法操作一次，合并兩次濾液，放置冰箱中析晶，待全部析出后，（觀察到：析出后，有黃色晶體，上清液為棕色，香卞甘味。抽濾時，固體為淡黃色。烘干后，呈黃綠色）。減壓抽濾，用少量蒸餾水洗滌蘆丁結晶，抽干，得粗制蘆丁，干燥，稱重，計算得率。（濾紙+漏斗145、02g，濾紙+漏斗+樣品146、617g，故知樣品為1、597g，得率為7、99%）

　�。ǜ郊硬襟E：旋轉蒸發(fā)，濃縮至50ml，觀察是否有殘余蘆丁。其中，重點注意旋轉蒸發(fā)儀的使用。組裝好儀器后，關閉玻璃氣閥，打開真空泵，至0、05Mpa時，打開加熱開關，旋轉開關等。然后開始旋轉蒸發(fā)，過程中，要耐心等待，并時刻注意蒸發(fā)液體，防止噴濺出蒸發(fā)瓶，造成實驗失敗。）

　　2、蘆丁的精制

　�。�1）方法一（醇—水重結晶法）取粗制蘆丁1g，（實際上為1.008g，其中，粗制蘆丁為淡黃色固體，有香味），置于250ml園底燒瓶中，加90%（實際為80%）乙醇30ml加熱回流15分鐘，趁熱抽濾。（濾液為黃色透明油狀液體）。濾液置250ml燒杯中，向濾液中加蒸餾水（約3~4倍量）至溶液呈明顯混濁，室溫放置，抽濾得精致蘆丁。用少量蒸餾水洗滌蘆丁結晶，晾干，稱重。（濾紙+漏斗29.69g，濾紙+漏斗+樣品30.20g，故知樣品為0.51g）。

　　3、鑒定

　�。�1）點滴顯色反應取蘆丁的甲醇溶液（供試液）分別點在濾紙上，揮去溶劑，然后分別加下列試劑，觀察顯色前后顏色及熒光的變化。

　　供試液：蘆丁的甲醇溶液。

　　顯色劑：2%三氯化鋁乙醇溶液[在紫外燈下λ365nm觀察顯色前后顏色及熒光的變化]

　�。�2）薄層色譜鑒定

　　吸附劑：硅膠GF254薄層板（5.0cm X 10.0cm）。

　　樣品：自制蘆�。ㄓ眉状既芙猓瑵舛燃s1mg/ml）

　　對照品：蘆丁對照品的甲醇溶液。

　　展開劑：三氯甲烷—甲醇—甲酸（7∶3∶0.5）

　　顯色：a、先在可見光下觀察，然后在紫外光下觀察（365nm紫外燈下觀察）

　�。ㄓ^察到兩點，呈深色）

　　b、噴三氯化鋁試劑前后觀察顏色變化（365nm紫外燈下觀察）

　　（對照組為淺褐色，實驗組為黃綠色，有拖尾）

　　實驗結果記錄：觀察斑點顏色，記錄圖譜并計算Rf值。

　　Rf樣品=3.00/5、75=0.522

　　總結：

　　1、實驗應細心，耐心，如旋轉蒸發(fā)時。

　　2從失敗中總結經(jīng)驗，改進實驗的方法，為以后積累經(jīng)驗。

　　3、實驗的過程中，需要團隊合作，從不同的方面來注意、分析實驗，得到最好的結果。

　　5 、注意事項

　�。�1）硼砂因能與蘆丁中的鄰二酚羥基結合，起保護鄰二酚羥基，不被氧化破壞的作用。實驗證明，提取時加入硼砂，產(chǎn)品的質量會好些。

　　（2）石灰乳既能達到堿溶解提取蘆丁的目的，還可以除去槐米中大量的粘液質和酸性樹脂（形成鈣鹽沉淀），但PH不能過高和長時間煮沸，因為會導致蘆丁的水解而開環(huán)和形成鈣鰲合物，影響產(chǎn)品的質量和產(chǎn)率。

　�。�3） PH過低（酸性太強）會使蘆丁形成洋鹽而收率降低。

　�。�4）稱量蘆丁時，先將帶濾紙的漏斗稱重，再將盛樣品的帶濾紙的漏斗稱重，差重即為樣品的重量。

　　實驗二、牡丹皮中丹皮酚的提取、分離與鑒定

　�。ㄒ唬�實驗目的要求

　　1、掌握揮發(fā)油的一般提取和鑒定方法。

　　2掌握用水蒸氣蒸餾法從牡丹皮中提取丹皮酚的方法。

　　3掌握丹皮酚的色譜檢識和定性鑒定方法。

　�。ǘ�）實驗的基本原理

　　利用揮發(fā)油與水不相混合，當受熱后，二者蒸氣壓的總和與大氣壓相等時，溶液即開始沸騰。繼續(xù)加熱，則揮發(fā)油可隨水蒸氣蒸餾出來。丹皮酚具有揮發(fā)性，可隨水蒸氣蒸餾，又因在冷水中難溶，故放冷后析出結晶。

　�。ㄈ�）實驗內容

　　1、用揮發(fā)油提取器提取牡丹皮中的丹皮酚。

　　2、溶劑重結晶或引種結晶純化丹皮酚。

　　3三氯化鐵顯色反應和薄層色譜法鑒定丹皮酚。

　　（四）實驗藥材儀器與試劑

　　1、實驗藥材：牡丹皮20g。

　　2、儀器：水蒸氣蒸餾裝置（包括揮發(fā)油提取器、蒸餾瓶500ml、回流冷凝管）、粉碎機、500ml燒杯，量筒，減壓過濾裝置，濾紙，布氏漏斗，層析缸等。

　　3、試劑：氯化鈉、三氯化鐵、鹽酸、乙醇、環(huán)己烷、乙酸乙酯等。

　　4材料：GF254硅膠薄層板

　�。ㄎ澹�實驗方法及注意事項

　　1、丹皮酚的提取

　　取牡丹皮20g（實際為20.066g），粉碎，置250ml圓底燒瓶（改為“三口瓶”）中，加100ml水、2ml乙醇和8g氯化鈉（實際為8.043g），（裝儀器時，注意凡士林的涂抹方法，不是全涂抹于塞子，而是口與塞各涂一半，注意方向），振搖混合后浸潤1h，連接揮發(fā)油提取器并加注冷凝水，自冷凝管上端加水使充滿測定器的刻度部分，并溢流入燒瓶時為止。（過程中現(xiàn)象為：乳白色粉末，混合后，顏色變深，上有咖啡色淺浮沫），水浴回流收集蒸餾液（共收集蒸餾液約60ml）。將蒸餾液放冷，分層，開啟測定器下端活塞使油層下降至其上端與刻度“0”線平齊，讀取揮發(fā)油量，計算百分含量。（出現(xiàn)問題：開始加熱時，油層在下，加熱全部壓回，重新開始。后來，溫度傳感器在瓶中與磁子相吸，處理過程中，由于頻繁開塞且時間過長，導致大量有效揮發(fā)性油物質從側口揮發(fā)，最終未能成功收集到大量油性物質。實驗失�。。┚従彿懦鏊�分，接收揮發(fā)油。揮發(fā)油靜置過夜，有白色針狀結晶析出，濾取結晶，干燥，稱重。如結晶不純，可加入95%乙醇至全部溶解，（約為粗晶的15倍），抽濾，濾液中加入4倍量的蒸餾水，使溶液呈乳白色，靜置后則有大量白色針狀結晶析出。（由于上一步的失敗，未進行此步驟，而是與“第七組”共同分享了他們的成果，從而順利進行實驗的下一步。在此表示感謝！）

　　2、丹皮酚的鑒定

　　（1）薄層色譜鑒定

　　吸附劑：硅膠GF254薄層板（5.0cm X 10.0cm）。

　　樣品：自制樣品的乙醇液，丹皮酚對照品乙醇溶液

　　展開劑：環(huán)己烷—乙酸乙酯—（3：1）或環(huán)己烷—三氯甲烷—無水乙醇（7：3：1）

　　顯色：噴5%三氯化鐵乙醇溶液或鹽酸酸化的5%三氯化鐵乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰

　　實驗結果記錄：觀察斑點顏色，記錄圖譜并計算Rf值。

　　Rf樣品=4、90/7、10=0、690

　　總結：

　　1、本實驗出現(xiàn)問題：溫度傳感器在瓶中與磁子相吸，處理過程中，由于頻繁開塞且時間過長，導致大量有效揮發(fā)性油物質從側口揮發(fā)，最終未能成功收集到大量油性物質。實驗應細心，耐心，不可操之過急。

　　2 、實驗的過程也是探索的過程，實驗失敗，得不到產(chǎn)物，需要我們從失敗中總結經(jīng)驗，防止再發(fā)生錯誤；改進實驗的方法，尋找合適的方法。

　　3、實驗指導及注意事項

　　1、提取完畢后，須待油水完全分層，在接受揮發(fā)油時，應注意盡量避免帶出水分。

　　2、產(chǎn)品應在干燥、密閉、避光條件下保存（注意，嚴禁放入烘箱中烘干）。

　　實驗三、黃柏中小檗堿的提取、分離與鑒定

　　實驗部分

　　實驗目的要求

　　學習和掌握小檗堿的結構特點和特殊的理化性質，及小檗堿的一般提取精制方法。

　　實驗的基本原理

　　小檗堿的提取原理

　　根據(jù)水溶性季銨堿在乙醇和堿水中溶解度大性質，利用乙醇回流法和堿水提取法進行提取。

　　小檗堿的分離原理

　�。�1）利用小檗堿的鹽酸鹽在水中溶解度�。�1：500），采用鹽析法使小檗堿沉淀析出，達到純化的目的。

　�。�2）利用鹽析法分離小檗堿

　　實驗內容

　　1、用乙醇回流提鹽析法、醇索氏提鹽析法和堿滲漉提鹽析法提取黃柏中鹽酸小檗堿。

　　2、溶劑重結晶精制鹽酸小檗堿。

　　3、薄層顯色反應鑒定鹽酸小檗堿

　　實驗藥材儀器與試劑

　　1、實驗藥材：黃柏30g。

　　2、儀器：250ml燒瓶、500ml燒杯，冷凝管、滲漉筒250ml，粉碎機、減壓過濾裝置、紗布、漏斗，層析缸等。

　　3、試劑：氧化鈣，氨水，NaCI，鹽酸、H2SO4，三氯甲烷，甲醇，乙醇，改良碘化鉍鉀等。

　　實驗方法

　　小檗堿的提取

　�。�2）方法二（醇索氏提鹽析法）稱取黃柏30g（實際上，試驗中取15g），（用粉碎機）粉碎成粗粉，用濾紙包成筒狀，置于索氏提取器中，（由于索氏提取器的內徑較小，在裝入粗粉的過程中要注意藥粉不能溢出，注意最后藥品不要高于管口），燒瓶中加入210ml的95%乙醇，（實驗中由于判斷失誤，開始只加了105ml，后來在過程中，由于虹吸較難，補加了一部分乙醇，大約70多ml），（水浴提取開始時，未加水浴鍋的蓋，后來及時加蓋，并用棉花裹住索氏提取器側管，防止因水蒸氣影響過熱），（過程中，觀察到：提取液剛開始為黃色液體，隨著提取次數(shù)增多，顏色變淡），水浴提取至無顏色。乙醇提取液濃縮至糖漿狀（濃縮采用旋轉蒸發(fā)儀，現(xiàn)象為：隨著蒸發(fā)的進行，液體減少，顏色變深），加水約80ml（實際為40ml），濾出沉淀（樹脂等雜質），濾液加入15%NaCI（W/V）（實際為6.05g），溶解后（為了加快溶解，可以把加入NaCI的濾液放在水浴上方，并用玻璃棒攪拌），放置過夜。析出沉淀，（沉淀為黃色固體，溶液為紅棕色），過濾沉淀物（鹽酸小檗堿）。烘干，稱重。（由于電子天平儀器的故障，第一次測量得到負質量。除去漏斗，重新采用分析天平測得：樣品+濾紙為0.4603g，濾紙為0.54516g，故粗略得樣品0.0087g。雖產(chǎn)量較低，但也是所有實驗組中唯一成功的一組，得到了經(jīng)驗：。

　　鹽酸小檗堿的精制

　　（2）方法二：取上述鹽酸小檗堿粗品全部，放入適宜的小錐形瓶（實際為燒瓶）中，加25倍量沸水，水浴加熱溶解，趁熱過濾，濾出不溶物，濾液在65℃時加濃鹽酸調PH2～3，放置1～2h，析晶，用蒸餾水洗至PH4.8，80℃以下干燥，得精制鹽酸小檗堿，稱重，計算得率。（由于粗制得的樣品較少，未進行此步驟，直接進入鑒定）。

　　鑒定

　�。�1）檢識反應

　　取鹽酸小檗堿（淺黃色）少許，加蒸餾水3ml（10ml），緩緩加熱，（小檗堿逐漸溶解，成淺黃色液體），溶解后加氫氧化鈉試液2滴（10滴），顯橙色，溶液放冷，過濾，取澄清濾液，加丙酮4滴，即發(fā)生混濁。（加入丙酮后可觀察到黃色渾濁）放置，生成黃色小檗堿沉淀。

　　（2）薄層色譜鑒定

　　吸附劑：硅膠GF254薄層板（5.0cm X 10.0cm）。

　　樣品：自制鹽酸小檗堿（用甲醇溶解）

　　展開劑：三氯甲烷—甲醇—氨水（14∶4∶0.5）

　　顯色：a、先在可見光下觀察，（觀察到點呈黃色，由于產(chǎn)品不純，樣品點后面還有拖尾現(xiàn)象）。然后在紫外光下觀察。（可以明顯的觀察到兩點的位置，為明顯的黑藍色，拖尾現(xiàn)象很明顯）。

　　b、噴改良碘化鉍鉀液顯色，前后觀察顏色變化（由黃色變?yōu)辄S棕色）。

　　實驗結果記錄：觀察斑點顏色，記錄圖譜并計算Rf值。

　　Rf樣品=4.10/7.60=0.539

　　Rf對照=3.40/7.60=0.741 （可看出，在純度上與對照品還是存在一定的差距）。

　　總結：

　　1、實驗應細心，耐心，不可操之過急。

　　2．從實驗得率低中，知道了藥物中要提取有用成分含量是很少的，析晶過程需要的時間很長，故藥物總是如此之貴。

　　3、實驗的過程也是探索的過程，每次實驗都有可能失敗，得不到產(chǎn)物或者產(chǎn)物量，需要我們從失敗中總結經(jīng)驗，改進實驗的方法，尋找到最合適的方法。

　　4、實驗的過程中，需要團隊合作，不同人從不同的方面來分析實驗，總結出誤差來源。

　　實驗指導及注意事項

　　1、從黃柏中提取小檗堿時，宜采用石灰浸泡，使所含的大量粘液質形成鈣鹽難溶于水而不被提出。

　　2、在精制鹽酸小檗堿的過程中，加熱煮沸以后，應迅速抽濾，以免溶液在過濾過程中變冷而析出鹽酸小檗堿結晶，造成產(chǎn)量損失。

　　3、加熱溶解樣品時溫度不宜太高，時間不宜太長，否則很容易析出固體，影響晶形。

　　4、小檗堿的干燥溫度不宜太高，否則產(chǎn)品的顏色加深，影響產(chǎn)品的質量。

　　5、展開劑中加氨水的量應嚴格控制，所用的容器一定要干，展開劑配好后不能產(chǎn)生混濁。

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