化學(xué)的實(shí)習(xí)報(bào)告
生產(chǎn)實(shí)習(xí)是學(xué)校為鍛煉本科生能力，讓我們能更好的與社會相適應(yīng)而組織的大三本科生的生產(chǎn)實(shí)習(xí)活動。接到要去生產(chǎn)實(shí)習(xí)的通知后，我很高興，并積極聯(lián)系，終于將實(shí)習(xí)地點(diǎn)定在大慶油田水處理與化學(xué)研究所。這是因?yàn)椋菏紫�，水化室的主要工作是油田水處理，化學(xué)劑量開發(fā)及檢驗(yàn)，和我們的專業(yè)有一定的關(guān)系;其次，我們的課程當(dāng)中并未涉及到有關(guān)水生細(xì)菌的詳細(xì)知識，在這里進(jìn)行生產(chǎn)實(shí)習(xí)可以擴(kuò)展這方面的知識;我們在實(shí)驗(yàn)中所學(xué)習(xí)的操作方法可以得到應(yīng)用基于以上幾方面的原因，我選擇在水處理所開始我的生產(chǎn)實(shí)習(xí)。
水處理與化學(xué)研究所隸屬于大慶油田工程設(shè)計(jì)開發(fā)有限公司，原名大慶油田建設(shè)設(shè)計(jì)水處理及油田化學(xué)研究室位于黑龍江省大慶市讓胡路區(qū)油田設(shè)計(jì)院。多年來研制出原油破乳劑、油田清防蠟劑、油田防蠟劑、原油降粘劑、原油消泡劑、污水絮凝劑、防垢劑、緩蝕劑等12個(gè)系列40余種油田化學(xué)劑。
該所現(xiàn)有高中級職稱的專業(yè)人才32人，博士2人，碩士8人。XX年通過了國家級計(jì)量認(rèn)證。同年與哈爾濱工業(yè)大學(xué)強(qiáng)強(qiáng)聯(lián)合，成立了哈爾濱工業(yè)大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程大慶研發(fā)中心。擁有研究儀器設(shè)備100多臺，其中進(jìn)口設(shè)備占60%實(shí)驗(yàn)室總面積為3000平方米。微生物實(shí)驗(yàn)室，可進(jìn)行菌種培養(yǎng)馴化分離。擁有國內(nèi)規(guī)模裝備最為先進(jìn)的三次采油實(shí)驗(yàn)室，可進(jìn)行各種除油及過濾工藝和設(shè)備試驗(yàn)可自動合成的高壓聚合反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室。
由于我的實(shí)習(xí)時(shí)間只有三個(gè)星期，故在劉老師的安排下對SRB做些認(rèn)知性的實(shí)習(xí)，以下為我的主要實(shí)習(xí)內(nèi)容
大致了解實(shí)驗(yàn)室自XX年開始啟動的SRB抑制課題的一些工藝原理流程
硫酸鹽還原菌是導(dǎo)致大慶油田地面系統(tǒng)產(chǎn)生硫化物從而造成設(shè)備腐蝕、濾料污染等危害的根源;實(shí)驗(yàn)室立足于微生物生態(tài)抑制，改變以往追求殺滅SRB數(shù)量的目的，轉(zhuǎn)而以抑制SRB活性為目的,是大慶油田系統(tǒng)控制SRB危害的新方法，可降低生產(chǎn)運(yùn)行成本
本研究采用的折流板反應(yīng)器有7個(gè)單元格，每個(gè)單元格長*寬*高=9.5cm*12cm*42cm,有效體積4.4L,單元格內(nèi)裝1/3高度的活性污泥.反應(yīng)器上部為排氣孔，排氣孔的導(dǎo)氣管伸到水封瓶液面以下，保持整個(gè)系統(tǒng)厭氧狀態(tài).
水箱中的水通過泵泵入反應(yīng)器，以推流形式流過各單元格，并從反應(yīng)器流出。
反應(yīng)器的啟動與運(yùn)行
將含有大量的硫酸鹽還原菌的厭氧污泥，接種到反應(yīng)器中;
現(xiàn)階段，反應(yīng)器進(jìn)水為配制的模擬水，在自來水中加入碳源、硫酸鈉、少量復(fù)合肥，用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)堿度;濃度：COD=1800mg/L,SO42-=600mg/L左右;進(jìn)水流量46L/d, 每個(gè)單元格水力停留時(shí)間=2.3hr
一、微生物鏡下觀察
G氏染色
步驟為：涂片→固定→結(jié)晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脫色→番紅復(fù)染→水洗→干燥→觀察。
涂片 與單染色法相同。
固定 與單染色法相同。
結(jié)晶紫染色 染色1分鐘，然后水洗并用吸水紙吸干。
碘液媒染 染色1分鐘，然后水洗并吸干。
酒精脫色 用95%酒精脫色，直到酒精不出現(xiàn)紫色時(shí)即停止，然后立即水洗，并吸干。
番紅復(fù)染 染色3分鐘左右，然后水洗并吸干。
鏡檢 在顯微鏡油鏡頭下觀察，菌體顯藍(lán)紫色的為革蘭氏陽性菌;菌體顯紅色的為革蘭氏陰性菌。
SRB為革蘭氏陰性菌
二、厭氧型為生物的培養(yǎng)
1.SRB菌
采用
Hungate厭氧操作技術(shù)、絕跡稀釋法以及“滾管”培養(yǎng)對樣本進(jìn)行分離，多次純化獲得純菌株SRB。
具體方法：向改良后Starkey培養(yǎng)基中加入0.2%的刃天青溶液，培養(yǎng)基煮沸后，加入L-半光鹽酸鹽0.5g，通入高純氮?dú)怛?qū)氧30min，121℃滅菌20min，固體培養(yǎng)基加入16%的瓊脂糖。
單獨(dú)配 3%的FeSO4?(NH4)2 SO4 厭氧
SRB菌株于液體培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)48h 后, 在Olympus COVER-018光學(xué)顯微鏡下革蘭氏染色觀察。
2.DNB菌
方法同
SRB菌，PH值最好在7，
藥品：
(NH4 ) 2SO4 3 g, KCl 0.1 g, K2HPO4 0.5 g, M gSO4?7H2O 0.5g,
Ca (NO3 )2 0.01 g, FeSO4?7H2O 8.0 g, 蒸餾水1 000 mL
121℃滅菌15 m in。
恒溫?fù)u床培養(yǎng)箱振蕩培養(yǎng)
由于此項(xiàng)操作開始時(shí)間較晚，至實(shí)習(xí)結(jié)束，菌落還未完成一個(gè)完整周期的培養(yǎng)。
三、水生細(xì)菌的計(jì)數(shù)
1.血球板計(jì)數(shù)法
取樣：先清洗一個(gè)容量為100毫升的取樣瓶或燒杯。取樣前輕輕輕振蕩試管攪拌，待分布均勻后，立即用注射器針管取樣，取樣的量為1毫升。加蒸餾水100倍稀釋。
樣品放于計(jì)數(shù)板：放置前必須將血球計(jì)數(shù)板和蓋玻片清洗干凈、擦干，不能有油污染和雜質(zhì)。將血球計(jì)數(shù)板平放在桌子上，蓋好蓋玻片;然后把樣品瓶輕輕搖動幾下，菌分布均勻，并立即用干凈的微吸管取樣品，迅速把微細(xì)吸管放到蓋玻片的邊緣處，輕壓微細(xì)吸管的橡皮帽，使樣品流入計(jì)數(shù)板內(nèi)。注意控制樣品流入量，不能過多，過多則流入到溝內(nèi);也不能過少，過少則計(jì)數(shù)時(shí)不準(zhǔn)確，應(yīng)充滿畫線方格及其周邊部分。還應(yīng)注意蓋玻片下不能有氣泡存在，否則會造成計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確。樣品吸入血球計(jì)數(shù)板后，稍停1分鐘，待細(xì)菌沉降在玻片表面上再在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。
計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)中央大格的4個(gè)角的中格，每個(gè)中格有25個(gè)小格，逐一計(jì)數(shù)，4個(gè)中格相加共計(jì)數(shù)100個(gè)小格。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)從計(jì)數(shù)框一角開始，在計(jì)數(shù)框邊緣的標(biāo)本應(yīng)按"計(jì)上不計(jì)下、計(jì)左不計(jì)右"的原則，計(jì)數(shù)出細(xì)菌的總量后，按下式計(jì)算出每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)量：細(xì)菌數(shù)量=100個(gè)小格的細(xì)菌數(shù)×4×10000×稀釋倍數(shù)。
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