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農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的實(shí)驗(yàn)報(bào)告
化學(xué)農(nóng)藥以其高效、快速的防治作用，在農(nóng)業(yè)病蟲(chóng)害的防治中得到廣泛的施用，但由于化學(xué)農(nóng)藥的有毒成分難以降解，致使這些有毒物質(zhì)在農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境中累積，又對(duì)環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品造成了污染。
俗話說(shuō)，國(guó)以民為本，民以食為天，食以安為先。目前，農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留問(wèn)題是影響食品安全的最突出的問(wèn)題，由于食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的食品而發(fā)生農(nóng)藥中毒的事件時(shí)有報(bào)道。如何快速、簡(jiǎn)單的檢測(cè)出農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留呢?為此，我們課題研究小組進(jìn)行了這次課題實(shí)驗(yàn)。
初中生年齡小，知識(shí)面不廣，生活經(jīng)驗(yàn)不多，因而，進(jìn)行農(nóng)藥殘留檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，相關(guān)的知識(shí)儲(chǔ)備是必要的。在實(shí)驗(yàn)之前，我們課題研究小組成員在學(xué)校電腦室上網(wǎng)查詢食品農(nóng)藥殘留的相關(guān)知識(shí)，收集了大量有用信息，在指導(dǎo)老師和學(xué)校的實(shí)驗(yàn)員、儀管員的協(xié)助和指導(dǎo)下，對(duì)這些信息進(jìn)行了梳理，購(gòu)買(mǎi)了必要的實(shí)驗(yàn)藥品，精心設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟。
人們每天進(jìn)食量的三分之一是蔬菜，在市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)的大潮中，少數(shù)菜農(nóng)為盲目追求經(jīng)濟(jì)效益，在蔬菜上使用高毒農(nóng)藥，使食用蔬菜而引起食物中毒的現(xiàn)象呈上升趨勢(shì)。我國(guó)蔬菜主要有3類(lèi)農(nóng)藥殘留：一是有機(jī)磷農(nóng)藥。作為神經(jīng)毒物，會(huì)引起神經(jīng)功能紊亂、震顫、精神錯(cuò)亂、語(yǔ)言失常等癥狀。二是擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)農(nóng)藥。毒性一般較大，還有蓄積性，中毒表現(xiàn)癥狀為神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和皮膚刺激癥狀。三是六六六、滴滴涕等有機(jī)氯農(nóng)藥。有機(jī)氯農(nóng)藥隨食物等途徑進(jìn)入人體后，主要蓄積于脂肪組織中，引起人體機(jī)能病變。因而，在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前，我們課題研究小組在銅鼎農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)上隨機(jī)購(gòu)買(mǎi)了白菜、冬瓜、空心菜等日常蔬菜，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。
我國(guó)有關(guān)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留試驗(yàn)和檢測(cè)方法的研究始于60年代初，現(xiàn)在，普遍采用氣液色譜、高效液相色譜等先進(jìn)儀器分析，特異性好，靈敏度高，但分析周期長(zhǎng)，設(shè)備昂貴，基層不易推廣。如何快速測(cè)定農(nóng)藥殘留，有四種生物快速檢驗(yàn)方法可供選擇：1、利用能產(chǎn)生熒光的細(xì)菌，當(dāng)細(xì)菌受到樣品中殘留農(nóng)藥作用后其熒光減弱，且減弱程度與毒物濃度呈一定的線性關(guān)系。該方法已能用來(lái)測(cè)定甲胺磷等常見(jiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥。2、利用實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的敏感家蠅對(duì)供試樣品中的殺蟲(chóng)劑、殺菌劑、除草劑及其有毒污染物進(jìn)行測(cè)定。如在一瓶?jī)?nèi)放人10克蔬菜后，再放入50只敏感家蠅，3小時(shí)后，若家蠅死亡5只以上，說(shuō)明農(nóng)藥污染超過(guò)限量標(biāo)準(zhǔn)，死亡在10只以上，說(shuō)明農(nóng)藥污染很?chē)?yán)重。3、分子生物學(xué)方法，該方法利用化學(xué)物質(zhì)在動(dòng)物體內(nèi)能產(chǎn)生免疫抗體的原理，將抗體篩選制成試劑盒，通過(guò)抗體與抗原之間發(fā)生的酶聯(lián)免疫反應(yīng)，然后比色確定農(nóng)藥的殘留量。4、生物化學(xué)法，根據(jù)酶的化學(xué)反應(yīng)原理，研制的農(nóng)藥速測(cè)卡，檢測(cè)蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留。我們這次采用的就是固化膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的速測(cè)卡技術(shù)，速測(cè)卡技術(shù)有整體測(cè)定法和表面測(cè)定法兩種方式。
1、整體測(cè)定法
實(shí)驗(yàn)之前，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室配制了PH7.5的緩沖液，PH7.5的緩沖液配制方法是：分別取15.0g磷酸氫二鈉 [Na2HPO4?12H2O]與1.59g無(wú)水磷酸二氫鉀[KH2 PO4 ]，用500mL蒸餾水溶解，配備了37℃±2℃恒溫箱。
我們的實(shí)驗(yàn)步驟是：
A、制作緩沖液空白對(duì)照卡。用白色藥片沾取緩沖液，制作成緩沖液空白對(duì)照卡，緩沖液空白對(duì)照卡要保持表面濕潤(rùn)。
B、選取有代表性的白菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見(jiàn)方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL緩沖溶液，震搖50次，靜置2min以上。
C、取一片速測(cè)卡，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面要保持濕潤(rùn)。
D、將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。
2、表面測(cè)定法(粗篩法)
A、制作緩沖液空白對(duì)照卡。用白色藥片沾取緩沖液，制作成緩沖液空白對(duì)照卡，緩沖液空白對(duì)照卡要保持表面濕潤(rùn)。
B、擦去蔬菜表面泥土，滴23滴緩沖溶液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。
C、取一片速測(cè)卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。
D、放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤(rùn)。
E、將速測(cè)卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。
酶被農(nóng)藥抑制為陽(yáng)性，未抑制為陰性，與空白對(duì)照卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果，白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同，為陰性結(jié)果。檢出蔬菜樣品為農(nóng)藥陽(yáng)性時(shí)，即可視為農(nóng)藥已超標(biāo)。
白菜、菠菜檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明農(nóng)藥殘留超標(biāo)，空心菜、冬瓜檢測(cè)結(jié)果為陰性，農(nóng)藥殘留未超標(biāo)。
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